مستخدم:Ruaa Mouyad/ملعب
الأنابيب المستخدمة لسحب عينة الدم :
أولا : الأنابيب المحتوية على مضادات التخثر Anticoagulants :
تستخدم مضادات التخثر في حالة استعمال عينات من البلازما او الدم الكلي ما تقتضيه التجربة وعليه يجب إضاقة مضاد للتخثر إلى أنبوبة جمع الدم حال محبه مباشرة وعادة يغلق جدار انبوبة جمع الدم بمضاد التخثر ، وتجدر الإشارة إلى أن اختيار مضاد التخثر يجب أن يقوم على اعتبار أن هذا المضاد لن يؤثر على التحليل الكيميائي وهذه النقطة مهمة جدا .
لأن مصادر التخثر هي مركبات كيميائية لأملاح بعض المعادن مثل الصوديوم والبوتاسيوم والليثيوم ، لذلك لا يمكن استخدام مضادات التخثر من أملاح الصوديوم والبوتاسيوم عندما يخص التحليل تعيين الإلكتروليتات كالصوديوم والبوتاسيوم لأن ذلك سوف يؤدي إلى خطا إيجابي أكبر في نتائج التحليل .
ولكن في مثل هذه الحالة يمكن استخدام مضادات و أما في حالة تحليل الكالسيوم في الدم فلا يمكن استخدام أكزالات الصوديوم لأن هذا الملح سوف يزيل كل ما تحتويه العيئة من الكالسيوم بترسيبه على شكل اوكزالات الكالسيوم وكذلك
تعمل مضادات التخثر على تثبيط فعالية بعض الإنزيمات ، مثل إنزيم الفوسفاتاز الحمضي Acid Phosphatase والفوسفاتاز القاعدي Alkaline Phosphatase وانزيم نازعة الهيدروجين من اللاكتات LDH أما أملاح فلوريد البوتاسيوم أو الصوديوم فتثبط فعالية إنزيم اليورياز بينما تنشط فعالية إنزيم الأميلاز ، كما تستطيع مضادات التخثر إفقاد الاختبار اهميته المرضية.
( 1 ) الأنبوبة المحتوية على ايثلين ثنائي الأمين رباعی حمض الخل EDTA:
مادة الأديتا هي اختصار Ethylene Diamine Tetra acetic Acid ، وهي تعمل على الأرتباط مع أيونات الكالسيوم ضرورية لتخثر الدم وبالتالي تمنعه بتشكيل ملح غير قابل للذوبان .
توجد في صورة الملح الصوديومي الثاني Disodium Salt او البوتاسي Dipotassium Salt ( والملح البوتاسي هو أكثر ذوباتية لذلك هو المفضل ) .
- تستخدم هذه الأنابيب للإختبارات التي تعتمد على الدم الكامل مثل صورة الدم الكاملة CBC ، نوع الدم Blood Group وعامل ريساس Rh .... إلخ .
- طريقة التحضير : قم بإذابة 1 جم من هذا المسحوق في 100 مل مياه مقطرة ، ثم أضف 50 ميكروليتر لكل 1 مل من الدم .
( 2 ) الأنبوبة المحتوية على سترات الصوديوم Sodium Citrate :
هذه المادة تحول أيونات الكالسيوم المتاينة ionized Ca إلى مركب غير متاین قابل للذوبان Unionized Soluble Complex ولكن ليست بقوة الأدیتا ۔
- طريقة التحضير : قم بإذابة 3.8 جم من هذا المسحوق في 100 مل مياه مقطرة ( إذن تركيزه 3.8 % ) .
تستخدم هذه الأنابيب لإختبارات عديدة ، ولكن الأكثر شيوعا هو اختبار سرعة الترسيب ESR ( 400 میکرولیتر من سترات الصوديوم مضافة الى 1.6 مل من الدم ) واختبارات السيولة PTT ، PT ( 200 میکرولیتر من عثرات الصوديوم مضاف الى 1,8 مل من الدم ) .
( 3 ) الأنبوبة المحتوية على فلورايد الصوديوم Sodium Flouride :
هذه المادة لها قدرة منع للتجلط ولكن بصورة ضعيفة عن طريق تكوين مركبات كالسيوم ضعيفة وسهلة الانفصال .
طريقة التحضير : قم بإضافة 5 ملجم من هذا المسحوق / مل من الدم وذلك لتعين السكر بالدم مادة الفلوراید تمنع تحلل السكر Glycolysis لمدة 3 أيام عن طريق تكوين مركب أيوني مع ايونات المغنيسيوم " Mg ، الذي يعيق انزيم الإينولاز Enolase المعتمد على أيونات المغنيسيوم في مسار تحلل السكر ، وبالتالي منع استهلاك الجلوكوز عن طريق كرات الدم الحمراء إذا ترك الدم في درجة حرارة الغرفة .
(4 ) الأنبوبة المحتوية على الهيبارين Heparin :
هذه المادة لها قدرة منع للتجلط عن طريق منع تحول الفيبرينوجين الى فيبرين ومنع تكون الثرومبين .
_طريقة التحضير : قم بإضافة 0.1 مل ( 100 میکرولیتر ) من هذا المحلول / 5 مل من الدم وتستخدم هذه الأنابيب لإختبارات عديدة ، ولكن الأكثر شيوعا هو اختبار غازات الدم و الد- دایمر D - dimer . علاوة على أنها مادة عالية الثمن ، عند استخدام هذه المادة يجب فحص الدم خلال 8 ساعات لأنها تقوم بمنع تجلط الدم فقط الفترات محدودة . أيضا تسبب تجمعات من الصفائح الدموية وبالتالي لا تفضل في اختبار صورة الدم الكاملة .
( 5 ) الأنبوبة المحتوية على اكزالات البوتاسيوم Potassium Oxalates :
يعمل هذا المضاد على ترسيب أيونات الكالسيوم وبذلك يمنع تجلط الدم ويفضل استعماله لسهولة ذوبته ، ونحتاج عادة إلى 10 - 20 ملجم من أكزالات البوتاسيوم لمنع تجلط 10 مل من الدم و 2 ملجم / مل من الدم ويستعمل هذا المحول عادة بتركيز 30 % ويعاير إلى الرقم الهيدروجيني 7.4 = PH باضافة محلول هيدروكسيد البوتاسيوم أو محلول حمض الأكزاليك ومن الجدير بالذكر أن 0.1 مل من محلول إكزالات البوتاسيوم المحمر تكفي .10 مل من الدم .
ثانيا : الأنابيب الغير المحتوية على مضادات التخثر Anticoagulants :
(1) أنبوبة المصل أو السيرم Serum :
هي انبوية لا تحتوي على أي من المواد السابق ذكرها كموانع للتجلط . للحصول على السيرم يتم نقل الدم المسحوب إلى أنبوبة الاختبار ثم يترك الدم لمدة تتراوح من 10 – 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة ويمكن أن تترك الأنبوبة لمدة أطول تصل إلى ساعتين إذا وضعت الأنبوبة في الثلاجة ، ويجب عدم تحريك الأنبوبة منعا لتحلل الدم Hemolysis طريقة أخرى تستعمل في بعض المختبرات الفصل السيرم وهي استخدام أنابيب خاصة مفرغة من الهواء تسمی Vacutainer حاوية على عنصر السيليكون وبعض منها يكون مضاف إليها الهلام Gel لغرض التقليل من عملية التحال الدموي ومنع المادة المتخثرة من الالتصاق على جدران الأنبوبة وفصل أكبر كمية ممكنة من السيرم للأنبوبة المضاف إليها الهلام ، وتفصل المادة المتخثرة عن السيرم باستخدام عملية الطرد المركزي - يتم معاملة السير د ذلك على حسب نوعية الاختبار فقد تسمح ظروف التجربة أن يبقى السيرم في درجة حرارة الغرفة او يحفظ في الثلاجة عند رجة حرارة مناسبة أو عند درجة التجمد أو يتطلب عمل الاختبار مباش بعد فصل السيرم الفرق بين عينة السيرم والبلازما هو أن عينة السيرم لا تحتوي على مواد مانعة للتخثر Anticoagulants ) . يفضل استعمال السيرم على البلازما تجنبا للتداخل الذي قد يحدث نتيجة استعمال المواد المانعة للتخثر ومن أمثلة ذلك تأثير مانعات التجلط على فعالية الإنزيمات ، وكذلك يفضل استعمال البلازما في بعض الفحوص التي تتطلب عزل الكريات عن البلازما باسرع ما يمكن فمثلا يزداد تركيز الفوسفات العضوية في البلازما نتيجة تسربها من الكريات الحمراء عند ترك الدم ولو لفترة وجيزة ، كما أن تحل الفوسفات العضوية إلى الفوسفات الغير عضوية بسبب فعالية إنزيمات الفوسفاتاز يزيد في تركيز الفوسفات غير العضوية في البلازما دون الحاجة إلى انتظار تحلل تجلط الدم ( كما في السيرم ) .
ملحوظة هامة : لابد أن يكون لون السيره و البلازما اصفرا صافية ولا يوجد فيه اي عكارة وإذا وجد اللون مبيضأ فإنه يدل على ارتفاع نسبة الدهون فيه مما يؤثر على نتيجة التحليل وبالمثل إذا كان اللون محمرة فانه يدل على تكسر كريات الدم الحمراء الذي يؤثر تأثيرا كبيرا على بعض النتائج وإذا كان لونه اصفر مخضرة فإنه يدل على زيادة نسبة البيليروبين بالدم.
أغطية الأنابيب ذات الرموز الملونة :
تشير السدادات المطاطية المستعملة كغطاء في أنابيب جميع الدم ، كما هو موضح بالشكل ، إلى وجود أو غياب المواد المضافة إلى الأنبوب والتي عادة ما تكون مواد حافظة أو مواد مضادة للتخثر ، فالمواد الحافظة تمنع التغيرات في العينة ومضادات التخثر تمنع تشكل الخثرة وتمنع التجلط وتستخدم أنابيب خاصة مفرغة من الهواء تسمي Vacutainer Tubes .
وتصنف هذه الأنابيب إلى الأنواع التالية:
( 1 ) الأنبوبة ذات الغطاء الأحمر Red Tube :
و تكون خالية من المواد المضافة مثل مضادات التخثر ويوجد أنواع منها يضاف لها عنصر السيليكون او الهلام Gel تكون ذات لون أحمر أو اسود ) لغرض التقليل من عملية التحلل الدموي و تستعمل مثل هذه الأنابيب في بنك الدم وبعض الاختبارات الكيميائية الروتينية والهرمونات كما تستعمل في قسم المصليات Serology ، ويتراوح الحجم اللازم لذلك من 10-2 مل أما بالنسبة للأطفال حديثي الولادة فيؤخذ على الأقل 0.7 مل من الدم مع وجود مادة فاصلة للسيرم و يجب عدم رج أو تقليب أو تحريك الدم بعد جمعه ، بل يترك لمدة 15 دقيقة حتى يتجلط كل الدم ثم تبدا عملية الطرد المركزي لفصل كريات الدم عن السيرم أو البلازما .
( 2 ) الأنبوبة ذات الغطاء الأرجواني Lavender Tube :
وتكون المواد المضافة عبارة عن EDTA وتستعمل في الفحوصات الدموية والمناعية وبنك الدم والفحوصات الكيميائية وعند الحاجة للعناصر المصورة CBC مثل كريات الدم الحمراء وفحوصات العد التفريقي لكريات الدم البيضاء Differential ، وتحتوي هذه الأنبوبة غالبأ على صوديوم EDTA وتمزج هذه الأنبوبة بشكل كامل بعد جمع الدم ولكن تمزج بلطف وهدوء حتى يتم توزيع المادة المانعة للتخثر بشكل كامل على مكونات الأنبوبة من الدم .
( 3 ) الأنبوبة ذات الغطاء الأخضر Green Tube :
ويكون مضاف إليها إما الصوديوم أو الليثيوم هيبارين Na or Li Heparin ويكون الحجم اللازم هو 10 مل وتستعمل في تحاليل قسم علم الوراثة الخلوي Cytogenetic وكذلك لقياس الرقم الهيدروجيني PH و غازات الدم والإلكتروليتات والهرمونات والأحماض الأمينية وقياس تركيز الأدوية العلاجية واختبار إنزيم نازعة الهيدروجين جلوكوز -6- فوسفات G6PDH .
ملحوظة هامة : الأنابيب ذات الغطاء الأصفر التي تحتوي على مادة فاصلة بالاضافة الى الهيبارين يطلق عليها (Plasma Separator Tubes ( PST ).
(4) الأنبوبة ذات الغطاء الأزرق Blue Tube :
ويكون مضاف إليها سترات الصوديوم Sodium Citrate حيث يضاف على الأقل 2.7 مل منه إلى حجم دم مماثل أي 2.7 مل من الدم أو يضاف 4.5 مل من الصوديوم سترات إلى الدم و تستعمل التحاليل تخثر الدم Coagulation مثل اختبار عامل الفيبرونوجين Fibrogen Factor ، ووقت البروثرومبين PT ووقت البروثرومبين الجزئي PTT .
(5) الأنبوبةذات الغطاء الأصفر Yellow Tube :
ويوضع فيها مادة فاصلة للسيرم مثل الهلام ويؤخذ 5 مل من الدم وتستعمل في قسم المصليات وأما في الأطفال حديثي الولادة فيؤخذ على الأقل 0.3 مل من الدم مع وجود مادة مضافة وهي EDTA .
ملحوظة هامة : الأنابيب ذات الغطاء الأصفر التي تحتوي على مادة فاصلة للسيرم يطلق عليها serum separator tubes (SST .
(6) الأنبوبة ذات الغطاء الرمادي Gray Tube :
وتستعمل لتعيين مستوى الجلوكوز وتحتوي على فلوريد البوتاسيوم الذي يمنع تغير تركيز الجلوكوز عن طريق إيقاف تحلل السكر في كريات الدم .
ملحوظة هامة للغاية :
عند سحب العينة من مواقع مختلفة فإن مكونات الدم كذلك تختلف ففي عملية ثقب الجلد Skin Puncture يشبه الدم الشرياني الدم الشعيري أكثر من الدم الوريدي ولهذا فإنه من الناحية المخبرية لا يوجد اختلافات واضحة بين الدم الشعيري والدم الشريان في كل من قيمة الرقم الهيدروجيني PH والضغط الجزيئي للأكسجين PO والضغط الجزيئي لثاني أكسيد الكربون , PCO وتشبع الأكسجين ، بينما الضغط الجزيئي لثاني أكسيد الكربون في الأوردة يكون أعلى حيث 100 مل ( 0.39 مل مول / لتر ) من مستوى الجلوكوز في الدم الشعيري نتيجة لاستهلاك الأنسجة له . ن 6 إلى 7 مل زنبق ريتل جلوكوز الدم في الأوردة بحوالي 7 ملجم/100 مل من مستوى الجلوكوز في الدم الشعيري نتيجة الأنسجة له .