حمض نووي ريبوزي: الفرق بين النسختين

[نسخة منشورة][نسخة منشورة]
تم حذف المحتوى تمت إضافة المحتوى
وسم: تعديل المحمول المتقدم
ط بوت:إزالة قالب:وصلة إنترويكي من وصلة زرقاء
وسم: تعديل المحمول المتقدم
سطر 227:
يُستخدم [[الرحلان الكهربائي]] بهلام ال[[أغاروز]] أو [[عديد الأكريلاميد]] بتواجد عوامل تمسيخ تقوم بفك البنية الثانوية للرنا لدراسة الرنا المستخلص. بعد الرحلان الكهربائي، من الممكن تحديد جزيئات معينة من الرنا عبر تقنية [[لطخة نورثرن]] التي يُنقل فيها الرنا من الهلام إلى [[غشاء]] يتم فيه تحديد أنواع الرنا عبر تهجينها بأحماض نووية مشعة أو موسومة بمواد فلورية والتي تعمل [[مسبار التهجين|كمسابير تهجين]].
[[ملف:MicroRNA and mRNA visualization in differentiating C1C12 cells.jpg|250px|تصغير|يسار|[[تهجين موضعي متألق]] يُظهر موضع الرنا الميكروي-133 (بالأخضر) ورنا رسول ال[[ميوجينين]] (بالأحمر) في الخلية العضلية لفأر، الدنا ظاهر بالأزرق.]]
رغم طرق الدراسة هذه، إلى أن تحديد أنواع وتسلسل الرنا حاليا يتم في أغلب الأحيان عبر نسخ الرنا إلى دنا ومضاعفته بواسطة {{وصلة إنترويكي|[[النسخ العكسي-تفاعل البوليميراز المتسلسل|Reverse transcription polymerase chain reaction}}]] وينتج عن ذلك [[دنا متمم]] للرنا المدروس. هنالك أسباب عديدة لاستخدام هذه الطريقة منها الاستقرارية العالية للدنا وحقيقة أن إنزيمات الدنا أكثر فعالية وأقل ميولا للخطأ. يمكن دراسة الدنا المتمم المتحصل عليه بطرق متعددة، على سبيل المثال تحديد الكمية الأصلية لنُسَخِ الرنا في عينة ما بواسطة [[تفاعل البوليميراز المتسلسل]] الكمي والذي يحدد عدد جزيئات الرنا الرسول المتواجدة في خلية ما لجين معين، أي مقدار وقوة نسخ الجين. يمثل مجموع جزيئات الدنا المتممة المتحصل عليها والذي يسمى {{وصلة إنترويكي|مكتبة الدنا المتمم|cDNA library}} جميع الجينات التي نُسخت إلى رنا ويمكن دراستها بطرق متعددة. من الطرق المميزة في دراسة مجموعة كبيرة من الجينات هي [[مصفوفة دي إن إيه دقيقة|مصفوفة الدنا الدقيقة]] التي تُسخدم فيها آلاف مسابير التهجين المتنوعة المشتقة من جينات معروفة، في هذه الطريقة ترتبط جزيئات الدنا المتممة في العينة بمسابير التهجين المثبتة على سطح الرقاقة (المصفوفة) ولأن العينة تكون موسومة في الغالب بال[[فلورية]] فإن الإرتباط يعطي إشارة معينة، بعد الغسيل لا تبقى الإشارة سوى في مكان ارتباط الدنا المتمم بالمسبار. بعد ذلك يتم التعرف على نُسَخ الجينات الجديدة عبر سَلسَلَة (تحديد تسلسل) تسلسلات الدنا المتتمة القصيرة والتي تسمى {{وصلة إنترويكي|تسلسل موسوم معبر عنه|Expressed sequence tag}} (EST). حاليا سَلسَلة جميع جزسئات الرنا في عينة ما يتم باستخدام جيل جديد من طرق تحديد التسلسل يسمى {{وصلة إنترويكي|سلسلة الرنا|RNA-Seq}}.
 
من بين الطرق الأخرى لدراسة الرنا: [[تهجين موضعي متألق|التهجين الموضعي المتألق]] ويسمح برؤية مكان رنا معين في الخلية، {{وصلة إنترويكي|برفلة الريبوسوم|Ribosome profiling}} الذي يحدد جزيئات الرنا الرسول التي في طور الترجمة، أو طرق [[تداخل الرنا|تدخل الرنا]] لتنظيم التعبير الجيني في الخلايا.