مقايسة أنزيمية: الفرق بين النسختين

[نسخة منشورة][نسخة منشورة]
تم حذف المحتوى تمت إضافة المحتوى
ZkBot (نقاش | مساهمات)
ط روبوت: استبدال قوالب: المراجع
ZkBot (نقاش | مساهمات)
ط بوت التصانيف المعادلة (26.1) +ترتيب+تنظيف (10.6): + 5 تصنيف
سطر 1:
[[ملف:DU640 spectrophotometer.jpg|thumbتصغير|leftيسار|250px|بيكمان DU640 UV/Vis مقياس طيف]]
'''المقايسة الأنزيمية''' أو '''الفحص الإنزيمي''' (ب[[الانجليزية]]: Enzyme assay) هي عبارة عن طرق [[مخبر|مخبرية]]ية لقياس الفعالية الأنزيمية <small>(enzymatic activity)</small> ، وهي أساسية لدراسة [[حركية الأنزيم]] و تثبطه .
<br />
منذ عام 1950، أحدث التحديد الأنزيمي للمستقلبات (metabolites) وقياس الفعاليات الأنزيميه في سوائل الجسم ثورة في ال[[تشخيص طبي|تشخيص الطبي]]. وفيما بعد، أصبحت المعايرات [[مناعة|المناعية]] ، ومؤاخر معايرات [[حمض نووي|الحمض النووي]]، أدوات لا غنى عنها في عالم الطب. ففي كواشف التشخيص الأنزيمي ، يتم تحديد مركبات ذات وزن جزئي صغير مثل [[حمض اللبن]] و[[الغلوكوز]] في [[الدم]] أو في [[المصل]] من خلال [[أنزيمات]] مناسبه عاليه الانتقائية. كما أنه وكبديل عن ذلك ، تستخدم تفاعلات مؤشره مناسبه لتحديد تركيز الأنزيمات في مصل الدم وتشخيص عمليات مدمرة في أعضاء [[جسم الإنسان]]. لقد دخلت الأختبارات الأنزيميه أيضا في مجال تحليل الأغذية، وفي مراقبه عمليات [[التخمير]] وفي [[حماية البيئة]]. فباستخدام أنزيمات [[نازع هيدروجين اللاكتات|نازعات الهيدروجين]]، يمكن استثمار تغير طيف امتصاص أو فلورة (fluorescence) الحمض النووي باختبارات بصرية. وهكذا، لدى استخدام أنزيم نازعه الهيدروجين المناسب يمكن قياس الغلوكوز و[[الإيثانول]] مباشره ، بينما يمكن تحديد مركبات عديدة أخري كميا ، مثل [[الأحماض الدهنية]] و[[الغليسرول]] بواسطه قرن تفاعلين أنزيمين مختلفين أو أكثر. ولأسباب عملية، من المفيد استخدام أقل ما يمكن من الأنزيمات المساعدة. أما في تحليل الأغذية ، فهناك مجموعه من السكريات (غلوكوز، [[غالاكتوز]]، [[مالتوز]] والأحماض (سيترات، مالات) يتم تحديدها أنزيميا، إذ انه من المهم تحديد كميه الغلوكوز بشكل شبه مستمر في غالبيه عمليات [[تخمير (كيمياء حيوية)|التخمير الميكروبي]]، وكذلك مراقبه مشابهه للغلوكوز واللاكتات في مزارع الخلايا الحيوانية. إضافة إلي ذلك، من الممكن أيضا استخدام التثبيط الأنزيمي كأداه تحليليه: مثلاً، في قياس تثبيط الأستيل كولين استراز (acetylchilineasterase) المعزول، وهو أنزيم أساسي في النقل العصبي يمكن استخدامه للدلاله علي وجود غازات أعصاب أو فوسفات عضوية أو [[مبيدات الحشرات]] الكارباماتيه.<ref>{{cite book |author=Passonneau, J.V., Lowry, O.H. |title=Enzymatic Analysis. A Practical Guide |publisher=Humana Press |location=Totowa NJ |year=1993 |pages=85–110}}</ref>
<ref>{{cite book |author=Passonneau, J.V., Lowry, O.H. |title=Enzymatic Analysis. A Practical Guide |publisher=Humana Press |location=Totowa NJ |year=1993 |pages=85–110 }}</ref>
 
== تحديد الفعاليات الإنزيمية ==
[[Fileملف:Luminol2006.jpg|thumbتصغير|[[ضيائية كيميائية]]]]
يعتبر قياس الفعاليات الأنزيميه في مصل [[دم|دم الخلايا]] وسيله هامة بالنسبه الى الطبيب. فعندما تتحطم الخلايا أثناء مرض ما مثل [[ذبحة صدرية|الذبحه الصدرية]]، [[التهاب الكبد]]، تشمع [[الكبد]]،[[التهاب البنكرياس]]، تتحرر الأنزيمات في مجري الدم. وعليه، يمكن رصد تحطم خلايا أعضاء مختلفه ك[[القلب]] والعضلات و[[الكبد]] وأجزائها (الأغشيه، [[السيتوبلاسم]]،..) بقياس الفاعلية الأنزيمية في الدم. كما يمكن تمييز نوعية (تخصص) العضو (تشخيص تفريقي)، حيث إن خلايا أعضاء مختلفه غالباً ما تحرر أنزيمات مختلفة أو أنواعاً فرعية أنزيميه مختلفه (أشكال مساويه (isoforms) ). وهكذا، يمكن رصد أمراض الكبد بقياس أنزيمات الترانس أميناز (transaminases)؛ والتهاب البنكرياس بقياس الألفا أميلاز (-amylase)؛ وتحطم خلايا عضله القلب بالكرياتين كيناز (creatine kinase) وهي أنزيمات تشخيص أساسيه.
إن تحديد هذه الأنزيمات يتبع نظاما حركيا يقوم علي استخدام المركبات الأولية التي لا تظهر أي تفاعليه متصلبة مع أنزيمات أخري، أو تظهر القليل منها.<br />
 
لقد كانت تنفذ المعايرات الطبيه الأنزيميه يدويا باستخدام عينات فرديه تم تحضيرها ،ثم تطبيق أجراءات ألتحضين ، وبعد ذلك التحديد الكمي من خلال جهاز [[مقياس الطيف]] البسيط ذي [[مرشح]] [[طول موجي|بأطوال موجية]] مناسبه. أما الآن ، فقد قاد التزايد الهائل في عدد الاختبارات الطبية الأنزيمية إلى تحويلها إلى النظام الآلي في مختبرات التشخيص المركزية، حيث تتم كافه مراحل التوزيع بالماصات (pipetting) ، والتحضين والقياس بواسطه ربوتات مخبريه، والترميز بالخطوط (Barcodes) أو أية طرائق أخري من أجل تعريف العينة.
 
== شرائح الاختبار ==
أحيانا ، يمكن أن تعتبر الزمن اللازم لتنفيذ معايرة ما في مختبر التشخيص المركزي طويلاً بالنسبه إلى بعض حالات العناية مثل، الفحص الذاتي اليومي الذي يقوم به مريض [[السكري]] والفحوصيات الإسعافية في غرف الطوارىء في المستشفيات. لذلك تستخدم غالبا في مثل هذه الأوضاع شرائح اختبارات التشخيص.<br />
تتكون هذه الشرائح من عدد فواصل صلبة وطبقات تفاعل (مايعرف ب" الكمياء الكافه")، تحضر فيها العينة حيث يتم الحصول على إشارة التفاعل بعد أضافه السائل (قطره دم مثلا). تَستخدِم هذه الاختبارات غالبا أنزيمات الأكسيداز (oxidases)؛ مع أنزيم بيرو كسيداز (peroxidase) وهو مساعد أضافي، لإعطاء ناتج التفاعل الأول، وهو [[ماء أكسجيني|الماء الاوكسجيني]] (h2o2)، الذي يؤكسد الصباغ الأبيض (leuko dye) الي مركب ملون و تتناسب كميته مع كميه المركب المراد قياسه في العينة. بعد ذلك ، يمكن تحليل شرائح الاختبار بصوره شبه آلية من خلال المقارنة المرئية مع مخطط الألوان المتدرجة أو بواسطه مقياس ضوئي ل[[معامل الانعكاس]].
 
 
== أنظر أيضا ==
السطر 23 ⟵ 21:
 
[[تصنيف:انزيمات]]
[[تصنيف:إنزيمات]]
[[تصنيف:طب]]
[[تصنيف:طرق البروتين]]
[[تصنيف:علم الأمراض]]
[[تصنيف:علم الأمراض السريري]]
[[تصنيف:علم الأمراض الكيميائي]]